人雌二醇(E2)elisa试剂盒
目的:探讨冷冻保存对人卵巢组织E2分泌功能的影响.方法:收集20例卵巢良性肿瘤手术患者的正常卵巢皮 质,随机分为新鲜对照组和玻璃化冷冻组,冻融后行体外培养,比较冻融前,后人卵巢组织的内分泌功能. 结果:①在体外培养期间,所有卵巢组织均能持续分泌E2.新鲜对照组E2分泌水平始终高于冷冻组,培养前10 d,差异有统计学意义(P0.05).②体外培养初期E2分泌水平较平稳,随培养时间延长E2水平呈波动性变化.结论:人卵巢组织冷 冻解冻后仍具有内分泌功能,随着培养时间的延长,新鲜组与冷冻组间E2分泌水平可能无差异.
ELISA方法的基本原理是:
①使抗原或抗体结合到某种固相载体表面,并保持其免疫活性。
②使抗原或抗体与某种酶连接成酶标抗原或抗体,这种酶标抗原或抗体既保留其免疫活性,又保留酶的活性。在测定时,把受检标本(测定其中的抗体或抗原)和酶标抗原或抗体按不同的步骤与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与其他物质分开,蕞后结合在固相载体上的酶量与标本中受检物质的量成一定的比例。加入酶反应的底物后,底物被酶催化变为有色产物,产物的量与标本中受检物质的量直接相关,故可根据颜色反应的深浅刊物定性或定量分析。由于酶的催化频率很高,故可放大反应效果,从而使测定方法达到很高的敏感度。因此,ELISA检测是一项定位、定性和定量(敏感度可达每毫升ng~pg的水平)的综合技术。常用的酶是辣根过氧化物酶(HRP)和碱性磷酸酶(AKP)
ELISA试剂盒的组分:
(1)已包被抗原或抗体的固相载体(免疫吸附剂);
(2)酶标记的抗原或抗体(结合物);
(3)酶的底物;
(4)阴性对照品和阳性对照品(定性测定中),参阅标准品和控制血清(定量测定中);
(5)结合物及标本的稀释液;
(6)洗涤液;
(7)酶反应终止液。